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詳細說明
DNA是由重復(fù)的核苷酸單元組成的長聚合物,鏈寬2.2到2.6納米,每個核苷酸單體長度為0.33納米。盡管每個單體占據(jù)相當(dāng)小的空間,但DNA聚合物的長度可以非常長,因為每個鏈可以有數(shù)百萬個核苷酸。例如,zui大的人類染色體(1號染色體)含有近2,浙江進口基因合成儀廠家供應(yīng),浙江進口基因合成儀廠家供應(yīng),浙江進口基因合成儀廠家供應(yīng).5億個堿基對。生物體中的DNA幾乎從不作為單鏈存在,而是作為一對彼此緊密相關(guān)的雙鏈,彼此交織在一起形成一個叫做雙螺旋的結(jié)構(gòu)。每個核苷酸由可與相鄰核苷酸共價鍵結(jié)合的側(cè)鏈骨架和含氮堿基組成,兩條鏈上的含氮堿基通過堿基互補以氫鍵相連。糖與含氮堿基形成核苷,核苷與一個或多個磷酸基團結(jié)合成為核苷酸。為了防止阻塞,節(jié)流閥應(yīng)該1個月清洗1次,清洗時,先在水中煮沸15min,然后再在甲醇中超聲波清洗。浙江進口基因合成儀廠家供應(yīng)
二、按試劑堿基添加方式分類,DNA合成儀可分為電磁閥氣動驅(qū)動,蠕動泵驅(qū)動兩種類型。1,電磁閥氣動驅(qū)動型:采用高于大氣壓的惰性氣體(氬氣,氮氣或氦氣)為堿基試劑溶液的驅(qū)動方式,通過微量電磁閥的開合添加試劑或堿基溶液。主要品牌包括ABI系列合成儀,oligomaker系列合成儀,biolytic系列合成儀,GE系列合成儀及mermade系列DNA合成儀等。2,采用蠕動泵驅(qū)動型:采用精密蠕動泵為堿基試劑溶液的驅(qū)動方式,通過蠕動泵驅(qū)動,滑塊的相互滑動選擇添加不同堿基試劑溶液。主要品牌包括德國POLYGEN系列DNA合成儀。三、按產(chǎn)物承載容器分,可分為需要一次性合成柱,無需一次性合成儀兩類。除德國polygen系列合成儀外,其它所有品牌合成儀,如,oligomaker,mermade,ASM,POLYPLEX,ABI等都使用一次性合成柱作為合成產(chǎn)物的承載容器。 浙江直銷基因合成儀廠家供應(yīng)瓶子都要放在亞磷酰胺及儲液瓶位置上,并保持氬氣壓力以及管路清潔。
設(shè)計用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細節(jié)隨不同的儀器而改變,**廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
一般地,DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅(qū)動液體試劑,也可采用氦氣驅(qū)動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統(tǒng)及精密蠕動泵,可不采用氣體為驅(qū)動系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動液體試劑時,需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓,通過合成管理軟件或手動打開電磁閥(一般打開時間為數(shù)ms),即可驅(qū)動液體試劑到所需的合成柱中。
基因合成法是在體外人為地利用酶學(xué)方法或化學(xué)方法合成目的基因。可分為兩類。①酶學(xué)法合成:以RNA為模板,通過逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。這是獲得真核結(jié)構(gòu)基因的**主要、**常用的方法。由于分離RNA單一組分很困難,所以合成的cDNA分子往往是混雜的,需要用基因分離法分離;這種方法不易得到全長的互補DNA分子,所以還要進一步剪切、拼接。②化學(xué)合成法:用化學(xué)法或化學(xué)法結(jié)合酶學(xué)法來合成目的基因。自1979年以來,國外已有近百種化學(xué)合成基因,包括胰島素基因,干擾素基因,以及乳糖操縱基因,啟動子調(diào)節(jié)序列等。使用這一方法首先要已知所要合成的基因的序列。 [1]電池還保持合成儀內(nèi)部的時鐘計時。
合成柱起始結(jié)合在載體(一般為CPG)上的核苷酸是裝在一次性的柱子中,除柱體外,還有2個固定過濾板和2個接頭,所有的部件都由惰性材料制成。固定過濾板是多孑L性聚苯乙烯固定在兩端蓋子中。入口和出口都是母路厄氏(1uer)接頭,與儀器的公路厄氏接頭配對。柱子是對稱的(沒有頂端和底部、前后之分),可以以任何方式與公路厄氏接頭相連接。每一個柱子都用顏色編號,表示不同的起始核苷酸,以及有一個唯yi的連續(xù)順序號碼。正常的流路是從底部進入,通過向上輸送液體,使CPG顆粒上升并保持懸浮狀態(tài)。溶劑和試劑的流速已經(jīng)設(shè)置好,能使顆粒適當(dāng)?shù)鼗旌稀P×康脑噭┛梢栽诹髀饭?jié)流閥中結(jié)晶,長期這樣會造成流路阻塞。江蘇進口基因合成儀代理
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。浙江進口基因合成儀廠家供應(yīng)
一、按照不同用途,DNA合成儀可分為實驗室型,工業(yè)型和大規(guī)模合成三種主要類型。1,實驗室型:主要指合成通量較小,且單柱合成產(chǎn)物為10-1000nmol的DNA合成儀,一般為合成柱數(shù)低于48柱(含)的DNA合成儀,主要適用于化學(xué)生物學(xué)實驗室,或某些剛起步的商業(yè)機構(gòu)。該類型DNA合成儀品牌較多,包括已停產(chǎn)的ABI391,394,3400,3900,BECKMAN oligo-1000,及仍然量產(chǎn)的polygen 10柱,12柱,mermade4,6,8,12,48柱;BIOSSET ASM-800, AZCO OLIGO-8等。浙江進口基因合成儀廠家供應(yīng)
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