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DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基質(zhì)上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。合成過程第yi個堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個堿基的5’-OH用二對甲氧三苯甲基DMT保護(hù),堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù),然后對3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化?!?OH和下個堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,2.然后用碘氧化成磷酸三酯3,天津直銷基因合成儀廠家供應(yīng).加入二氯乙酸除去第二個堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT循環(huán)進(jìn)行加入下一個堿基合成完畢后1。用苯硫酚除去5’-OH上的保護(hù)劑DMT2。用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開,洗脫3。用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護(hù)劑4。除去氫氧化銨,天津直銷基因合成儀廠家供應(yīng),天津直銷基因合成儀廠家供應(yīng),真空抽干5。液相色譜或者PAGE,回收片段**長的。
基因合成法是在體外人為地利用酶學(xué)方法或化學(xué)方法合成目的基因。可分為兩類。①酶學(xué)法合成:以RNA為模板,通過逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。這是獲得真核結(jié)構(gòu)基因的**主要、**常用的方法。由于分離RNA單一組分很困難,所以合成的cDNA分子往往是混雜的,需要用基因分離法分離;這種方法不易得到全長的互補DNA分子,所以還要進(jìn)一步剪切、拼接。②化學(xué)合成法:用化學(xué)法或化學(xué)法結(jié)合酶學(xué)法來合成目的基因。自1979年以來,國外已有近百種化學(xué)合成基因,包括胰島素基因,干擾素基因,以及乳糖操縱基因,啟動子調(diào)節(jié)序列等。使用這一方法首先要已知所要合成的基因的序列。 [1]
基因是遺傳的基本單元,攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,通過復(fù)制,把遺傳信息傳遞給下一代,指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成來表達(dá)自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個體的性狀表達(dá)?;驒z測是通過血液、其他體液、或細(xì)胞對DNA進(jìn)行檢測的技術(shù),是取被檢測者外周靜脈血或其他組zhi細(xì)胞,擴增其基因信息后,通過特定設(shè)備對被檢測者細(xì)胞中的DNA分子信息作檢測,分析它所含有的基因類型和基因缺xian及其表達(dá)功能是否正常的一種方法,從而使人們能了解自己的基因信息,明確病因或預(yù)知身體患某種疾病的風(fēng)險?;驒z測可以診斷疾病,也可以用于疾病風(fēng)險的預(yù)測。疾病診斷是用基因檢測技術(shù)檢測引起遺傳性疾病的突變基因。應(yīng)用**廣fan的基因檢測是新生兒遺傳性疾病的檢測、遺傳疾病的診斷和某些常見病的輔助診斷。
文章來源地址: http://m.cdcfah.com/cp/437970.html
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