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DNA合成儀設(shè)計(jì)用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動(dòng)化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細(xì)節(jié)隨不同的儀器而改變,浙江操作性能好基因合成儀廠家直供,**廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。中文名DNA合成儀目錄1結(jié)構(gòu)和性能2操作步驟3日常維護(hù)4特點(diǎn)與性能5發(fā)展DNA合成儀結(jié)構(gòu)和性能編輯試劑驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)一般地,DNA合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮?dú)饧半姶砰y組驅(qū)動(dòng)液體試劑,也可采用氦氣驅(qū)動(dòng)試劑。某些合成儀采用sliderblock滑塊系統(tǒng)及精密蠕動(dòng)泵,可不采用氣體為驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動(dòng)液體試劑時(shí),需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓,通過合成管理軟件或手動(dòng)打開電磁閥(一般打開時(shí)間為數(shù)ms),即可驅(qū)動(dòng)液體試劑到所需的合成柱中。試劑和堿基瓶組DNA合成儀一般需堿基瓶組及試劑瓶組。試劑瓶組一般**少為6個(gè),含脫保護(hù)劑(Deb)、活化劑(act),浙江操作性能好基因合成儀廠家直供、蓋帽試劑A(capA)、蓋帽試劑B(capB),浙江操作性能好基因合成儀廠家直供、氧化劑(OXI)及洗脫乙腈(),每種儀器一般都多設(shè)置1-2個(gè)試劑瓶位,用于特殊產(chǎn)物的合成。堿基瓶組一般**少為4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)堿基(A/C/G/T)。
DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基質(zhì)上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。合成過程第yi個(gè)堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個(gè)堿基的5’-OH用二對(duì)甲氧三苯甲基DMT保護(hù),堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù),然后對(duì)3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化。’-OH和下個(gè)堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,2.然后用碘氧化成磷酸三酯3.加入二氯乙酸除去第二個(gè)堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT循環(huán)進(jìn)行加入下一個(gè)堿基合成完畢后1。用苯硫酚除去5’-OH上的保護(hù)劑DMT2。用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開,洗脫3。用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護(hù)劑4。除去氫氧化銨,真空抽干5。液相色譜或者PAGE,回收片段**長的。
設(shè)計(jì)用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動(dòng)化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細(xì)節(jié)隨不同的儀器而改變,**廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
一般地,DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮?dú)饧半姶砰y組驅(qū)動(dòng)液體試劑,也可采用氦氣驅(qū)動(dòng)試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統(tǒng)及精密蠕動(dòng)泵,可不采用氣體為驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動(dòng)液體試劑時(shí),需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓,通過合成管理軟件或手動(dòng)打開電磁閥(一般打開時(shí)間為數(shù)ms),即可驅(qū)動(dòng)液體試劑到所需的合成柱中。
文章來源地址: http://m.cdcfah.com/cp/417420.html
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