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病du采樣管的樣本采集流程:1. 鼻拭子:將拭子頭輕輕插入鼻腔內(nèi),在鼻腔內(nèi)輕刮腔壁。將拭子頭浸入采樣液中,尾部棄去。2. 咽拭子:用拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將拭子頭浸入采樣液中,尾部棄去。3、唾液采集器:將唾液吐進(jìn)漏斗,直到液體唾液(非氣泡)量達(dá)到采集管管壁上的要求的唾液線高度。機(jī)體被病du傳播后,病du通過(guò)鼻腔和口腔進(jìn)入到咽喉部,再到氣管和支氣管,進(jìn)而到達(dá)肺泡,肺泡上皮細(xì)胞的病du受體表達(dá)占比高,氣道上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等則占比極低,因此,下呼吸道的病du量明顯高于上呼吸道,重慶肺炎病毒保存液生產(chǎn)廠家,呼吸道病du檢出可能性又高于血液??傊?,重慶肺炎病毒保存液生產(chǎn)廠家,重慶肺炎病毒保存液生產(chǎn)廠家,肺泡灌洗液中容易檢出病du核酸,其次是深咳痰,再是鼻咽部,再次是口咽部。因?yàn)椴僮鞯姆奖阈院突颊叩慕邮艹潭?,目前臨床常用的標(biāo)本是口咽部拭子,其次是鼻咽部拭子,而在某些患者中,口咽部或鼻咽部細(xì)胞中病du量較少或極低,如果只取口咽部或鼻咽部標(biāo)本檢測(cè),病du核酸就檢測(cè)不到,如能同時(shí)或在疾病過(guò)程中的不同時(shí)間采取多種部位的標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),會(huì)有助于避免因病du采樣工具的使用不當(dāng)而造成的“假陰性”的出現(xiàn)。采樣管選用非離子表面活性劑,清洗效果好,適用于自動(dòng)清洗機(jī)或超聲波清洗。重慶肺炎病毒保存液生產(chǎn)廠家
關(guān)于病du采樣管的生產(chǎn)制造:病du采樣管屬于醫(yī)療器械產(chǎn)品,國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)大多數(shù)是按照一類產(chǎn)品來(lái)備案的,按照二類產(chǎn)品注冊(cè)的企業(yè)很少,而在**剛爆發(fā)初期,為了滿足武漢等地的緊急需求,有很多企業(yè)都是走“應(yīng)急通道”申請(qǐng)的一類備案許可。病du采樣管由采樣拭子、病du保存液和外包裝等組成。①、采樣拭子:采樣拭子不能夠使用或添加海藻酸鈣類助劑和不能使用木棒或竹簽采樣拭子直接接觸采樣部位,其采樣頭的材質(zhì)和后續(xù)的檢測(cè)關(guān)系密切。采樣拭子頭不能使用海藻酸鈣海綿或木棒子(包括竹簽),拭子頭部的材料也不可以是棉花制品,因?yàn)槊藁ǖ睦w維對(duì)蛋白質(zhì)的吸附較強(qiáng),不易洗脫到后續(xù)的保存液中,而含有海藻酸鈣和木制成分的木棒或竹簽折斷后浸泡在保存液中也會(huì)吸附蛋白,甚至?xí)?duì)后續(xù)的PCR光反應(yīng)有克制作用。制造拭子頭的材料推薦使用PE纖維、聚酯纖維、聚丙烯纖維等合成纖維,不推薦棉花等天然纖維,也不推薦尼龍類的纖維,因?yàn)槟猃堫惱w維(類似于牙刷刷頭)的吸水性不佳,導(dǎo)致采樣量不足,影響檢出率。合肥咽拭子病毒采樣管生產(chǎn)廠家滿足樣本采集到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的時(shí)間;有需要限制或者預(yù)防共生微生物增殖,確保診斷實(shí)驗(yàn)的可靠性。
檢測(cè)特異序列的方法常見(jiàn)的是熒光定量PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。因PCR反應(yīng)模板*為DNA,因此在進(jìn)行PCR反應(yīng)前,應(yīng)將核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為DNA。在PCR反應(yīng)體系中,包含一對(duì)特異性引物以及一個(gè)Taqman探針,該探針為一段特異性寡核苷酸序列,兩端分別標(biāo)記了報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;如反應(yīng)體系存在靶序列,PCR反應(yīng)時(shí)探針與模板結(jié)合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解,報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,發(fā)出熒光。每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測(cè)出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)(Ct值)與病毒核酸濃度有關(guān),病毒核酸濃度越高,Ct值越小。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會(huì)依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽(yáng)性判斷值。
如何選擇病du采樣管:采樣拭子有些采樣拭子病du載量低、折斷點(diǎn)不合適、操作人員不易折斷等,不限于制了采樣的效率,還易造成核酸檢測(cè)的假陰性。故采樣拭子頭應(yīng)采用合成纖維植絨為宜,不應(yīng)選擇棉花或者海藻酸鈣海綿等材質(zhì);拭子柄的材料推薦使用空心聚苯乙烯(PS)擠出管或聚丙烯(PP)注塑壓痕管,不可用木棒或者竹簽等材質(zhì)。因含有海藻酸鈣和木制成分的木棒或竹簽折斷后浸泡在保存液中會(huì)吸附蛋白,甚至?xí)?duì)后續(xù)的試驗(yàn)有干擾作用,棉花的纖維對(duì)蛋白質(zhì)的吸附較強(qiáng),不易洗脫;拭子長(zhǎng)度不宜過(guò)短,且折斷位置也不宜太接近拭子頭部,以免操作時(shí)沾染到患者體液;折斷點(diǎn)位置要合理,配合采樣管折斷時(shí),避免管內(nèi)液體外濺造成的污染風(fēng)險(xiǎn)。將采集樣本之后的采樣拭子放置到病毒采樣管中。
很多**從實(shí)踐工作中總結(jié)出的經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為,鼻咽拭子標(biāo)本2019-nCoV核酸檢測(cè)陽(yáng)性率高于口咽拭子,下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液標(biāo)本陽(yáng)性率高于上呼吸道的口、鼻咽拭子采集的標(biāo)本(這也是這兩天被評(píng)論的某患者咽拭子標(biāo)本三次核酸檢測(cè)陰性,收住院后在搶救過(guò)程中采集肺泡灌洗液標(biāo)本核酸檢測(cè)陽(yáng)性的原因),但下呼吸道的痰、肺泡灌洗液標(biāo)本采集難度大、易引起患者噴射導(dǎo)致采集操作者風(fēng)險(xiǎn)大,一般情況不建議使用(氣管切開(kāi)、上呼吸機(jī)搶救病人可用)。近期發(fā)布的第五版《的肺炎診療方案》已將標(biāo)本采集“咽拭子”更新為“鼻咽拭子”。為了提高檢測(cè)陽(yáng)性率,建議采集同一病人多部位標(biāo)本,合并進(jìn)行檢測(cè)。比如,用口咽拭子、鼻咽拭子同時(shí)采集標(biāo)本,然后放到同一采集管中送檢。對(duì)于有消化道癥狀的疑似患者,同時(shí)采集糞便或肛拭子進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)本采集方法:近期用于2019-nCoV核酸檢測(cè)標(biāo)本主要是口咽拭子,采集時(shí)讓患者張大嘴后用特制棉簽或小刷頭刮取其咽部采集帶標(biāo)本。如果平時(shí)醫(yī)護(hù)人員咽拭子取樣不多,刮取標(biāo)本時(shí)患者的反應(yīng)又比較大,往往導(dǎo)致刮取標(biāo)本的位置不對(duì),或力度和時(shí)間不夠,沒(méi)有刮取到帶的標(biāo)本或刮取到的帶標(biāo)本量少,導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果陰性。 采樣拭子應(yīng)保證采樣量和釋放量,所選材料不能有影響后續(xù)檢測(cè)的物質(zhì)。青島流感病毒保存管生產(chǎn)廠家
采樣管用于從采樣現(xiàn)場(chǎng)到檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)送鼻咽拭子標(biāo)本或特定部位的組織標(biāo)本。重慶肺炎病毒保存液生產(chǎn)廠家
病du保存液成分及檢驗(yàn)原理:1、保存液成分為:Hanks液基礎(chǔ),慶大霉素,細(xì)菌抗sheng素,BSA (V) ,冷凍保護(hù)劑、生物緩沖劑及氨基酸等。2、多種抗sheng素聯(lián)合,具有抗細(xì)菌和抗細(xì)菌的作用。3、牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,可在病du的蛋白質(zhì)外殼形成一種保護(hù)膜,使其不易分解,保證病du的完整性。4、Hanks緩沖液構(gòu)建的中性環(huán)境,有助于增加病du的生存時(shí)間和傳播穩(wěn)定性。5、用于臨床流感、禽流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病du標(biāo)本及支原體、脲原體、衣原體等標(biāo)本的采集及運(yùn)送。重慶肺炎病毒保存液生產(chǎn)廠家
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