需求數(shù)量:0
價格要求:面議
所在地:上海市
包裝要求:
產(chǎn)品關(guān)鍵詞:上海病原微生物熒光定量PCR檢測服務
***更新:2020-06-10 01:21:24
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詳細說明
熒光信號**擴增階段:只有在熒光產(chǎn)生進入**期, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,所以在PCR反應處于**期的某一點上來檢測PCR產(chǎn)物的量,由此來推斷模板**初的含量而進行定量分析。研究表明,每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在線性關(guān)系,起始拷貝數(shù)越多,Ct值越小。通過已知起始拷貝數(shù)的標準品可得到標準曲線,上海病原微生物熒光定量PCR檢測服務,上海病原微生物熒光定量PCR檢測服務,只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數(shù)
在平臺期,上海病原微生物熒光定量PCR檢測服務,擴增產(chǎn)物已不再呈**級的增加,所以反應終產(chǎn)物量與起始模板量之間已經(jīng)不存在線性關(guān)系,通過反應終產(chǎn)物也算不出起始DNA拷貝數(shù)
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用***反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
***定量:用已知的標準曲線對未知樣本的量進行推算的方法為***定量法。此種方法需要明確標準樣品的濃度情況,然后稀釋標準樣品,分為幾個不同梯度濃度然后進行反應測試。橫坐標為標準品拷貝數(shù)的對數(shù)值,縱坐標為測得的Ct值,進而繪制出標準曲線。以標準曲線為基礎,在定量分析未知樣品過程中根據(jù)其ct值能夠?qū)悠鹗伎截悢?shù)推算出
實時熒光定量PCR技術(shù)總結(jié)為以下幾點。特異性強 靈敏度高 重復性好 檢測速度快 自動化程度高
實時熒光定量PCR具有靈敏度高、特異性高和精確性高的優(yōu)點,此項技術(shù)已被應用于分子生物學、醫(yī)學、食品檢測和環(huán)境監(jiān)測等多個領域
文章來源地址: http://m.cdcfah.com/cp/205790.html
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