三、蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定 蛋白質(zhì)分子量測(cè)定的方法很多，目前常用的方法有以下幾種。 3.1 凝膠過(guò)濾法 凝膠過(guò)濾法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的原理如“分離純化方法”中所 述。一定型號(hào)的凝膠顆粒上具有一定大小的孔隙，只允許較小的分子進(jìn)入膠粒，而大于孔隙的分子則不能進(jìn)入膠粒而被排阻在膠粒外面。用洗脫液洗脫時(shí)，被排阻的分子量大的蛋白質(zhì)先被洗脫下來(lái)，隨后能夠進(jìn)入顆粒的蛋白質(zhì)也按分子量大小而先后被洗脫下來(lái)，分子量越小的越后被洗脫下來(lái)。由于不同排阻范圍的葡聚糖凝膠有一特定的蛋白質(zhì)分子量范圍，專(zhuān)業(yè)蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)，在此范圍內(nèi)，分子量的對(duì)數(shù)和洗脫體積之間成線(xiàn)性關(guān)系。因此，用幾種已知分子量的蛋白質(zhì)為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行層析分析，專(zhuān)業(yè)蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)，以每種蛋白質(zhì)的洗脫體積對(duì)它們的分子量的對(duì)數(shù)作圖，繪制出標(biāo)準(zhǔn)洗脫曲線(xiàn)，專(zhuān)業(yè)蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)。未知蛋白質(zhì)在同樣的條件下進(jìn)行層析分析，根據(jù)其所用的洗脫體積，從標(biāo)準(zhǔn)洗脫曲線(xiàn)上可求出此未知蛋白質(zhì)對(duì)應(yīng)的分子量來(lái)。專(zhuān)業(yè)蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)

三、蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定 3.3 沉降法 沉降法又稱(chēng)超速離心法。蛋白質(zhì)溶液在受到強(qiáng)大的離心力作用時(shí)，蛋白質(zhì)分子趨于下沉，沉降速度與蛋白質(zhì)分子的大小、密度和分子形狀有關(guān)，也與溶劑的密度和粘度有關(guān)。蛋白質(zhì)顆粒在離心場(chǎng)中的沉降速度用每單位時(shí)間內(nèi)顆粒下沉的距離來(lái)表示。 在離心場(chǎng)中，蛋白質(zhì)分子所受到的凈離心力（離心力減去浮力）與溶劑的摩擦力平衡時(shí)，每單位離心場(chǎng)強(qiáng)度的沉降速度稱(chēng)為沉降系數(shù)（Sedimentation Coefficient）。國(guó)際上采用Svedberg單位作為沉降系數(shù)的單位，用S表示，以紀(jì)念超速離心法的創(chuàng)始人，瑞典***的蛋白質(zhì)化學(xué)家T.Svedberg。一個(gè)Svedberg單位（或直接稱(chēng)一個(gè)S）為1×10—13s。蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)大約在1×10—13～200×10—13s范圍內(nèi)，即1S～200S。浙江智能蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)

蛋白質(zhì)分離純化步驟（二） 2.2 蛋白質(zhì)的抽提 通常選擇適當(dāng)?shù)木彌_液溶劑把蛋白質(zhì)提取出來(lái)。抽提所用緩沖液的pH、離子強(qiáng)度、組成成分等條件的選擇應(yīng)根據(jù)欲制備的蛋白質(zhì)的性質(zhì)而定。如膜蛋白的抽提，抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑（十二烷基磺酸鈉、tritonX-100等），使膜結(jié)構(gòu)破壞，利于蛋白質(zhì)與膜分離。在抽提過(guò)程中，應(yīng)注意溫度，避免劇烈攪拌等，以防止蛋白質(zhì)的變性。 2.3蛋白質(zhì)粗制品的獲得 選用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑺牡鞍踪|(zhì)與其它雜蛋白分離開(kāi)來(lái)。比較方便的有效方法是根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的差異進(jìn)行的分離。常用的有下列幾種方法： 1. 等電點(diǎn)沉淀法 不同蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同，可用等電點(diǎn)沉淀法使它們相互分離。 2. 鹽析法 不同蛋白質(zhì)鹽析所需要的鹽飽和度不同，所以可通過(guò)調(diào)節(jié)鹽濃度將目的蛋白沉淀析出。被鹽析沉淀下來(lái)的蛋白質(zhì)仍保持其天然性質(zhì)，并能再度溶解而不變性。 3. 有機(jī)溶劑沉淀法 中性有機(jī)溶劑如乙醇、**，它們的介電常數(shù)比水低。能使大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度降低，進(jìn)而從溶液中沉淀出來(lái)，因此可用來(lái)沉淀蛋白質(zhì)。此外，有機(jī)溶劑會(huì)破壞蛋白質(zhì)表面的水化層，促使蛋白質(zhì)分子變得不穩(wěn)定而析出。由于有機(jī)溶劑會(huì)使蛋白質(zhì)變性，使用該法時(shí)，要注意在低溫下操作.

蛋白質(zhì)分離純化步驟（二） 2.4.3. 親和層析 親和層析（affinity-chromatography）分離技術(shù)是根據(jù)許多蛋白質(zhì)對(duì)特定的化學(xué)基團(tuán)具有專(zhuān)一性結(jié)合的原理。這些能被生物大分子如蛋白質(zhì)所識(shí)別并與之結(jié)合的基團(tuán)稱(chēng)為配基或配體（ligand）。親和層析是一種極有效的分離純化蛋白質(zhì)的方法。例如酶對(duì)它的底物具有特殊的親和力；抗原和抗體互為配基。以伴刀豆球蛋白A（concanavalin A）的分離純化為例，由于該蛋白對(duì)葡萄糖有專(zhuān)一性親和吸附，因此可把葡萄糖通過(guò)適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)反應(yīng)共價(jià)地連接到像瓊脂糖凝膠一類(lèi)的載體表面上。為了防止載體表面的空間位阻影響待分離的蛋白質(zhì)大分子與其配基的結(jié)合，在配基和載體之間往往插入一段所謂的連接臂（或稱(chēng)為間隔臂，spacerarm），使配體與載體之間保持足夠的距離。 將這種多糖顆粒裝入一定規(guī)格的玻璃管中就制成了一根親和層析柱。當(dāng)含有伴刀豆球蛋白的提取液加到層析柱的上部，并沿柱從上往下過(guò)時(shí)，待純化的蛋白質(zhì)與其特異性配基結(jié)合而被吸附到柱上，其他蛋白因不能與葡萄糖配基結(jié)合將通過(guò)柱子而流出（圖2-28a）。然后采用一定的洗脫條件，如濃的葡萄糖溶液進(jìn)行洗脫，即可把該蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)，達(dá)到與其它蛋白質(zhì)分離的目的。

    蛋白質(zhì)純化方法-親和層析親和層析法包括特異性配體親和層析法以及通用性配體親和層析法。比較這兩種親和層析法。特異性配體親和層析法通常將復(fù)雜的生命大分子物質(zhì)作為配體，它的結(jié)合力比較大河吸附選擇性比較強(qiáng)。而通用性配體親和層析法通常將簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)作為配體，因此，它具有低廉的成本，吸附容量比較高，通過(guò)對(duì)吸附和脫附條件的改善能夠使得層析的分辨率提高。原理親和層析的原理類(lèi)似于酶-底物，***-受體與抗原-抗體等特異性反應(yīng)的機(jī)理。有一定的親和力在每對(duì)反應(yīng)物之間。與在酶與底物的反應(yīng)中，只有特異的底物才可以結(jié)合一定的酶，使復(fù)合物產(chǎn)生相同。在親和層析中，只有特異的配體才可以和一定的生命大分子有親和力，并且使復(fù)合物產(chǎn)生。親和層析配體呈固相，而酶與底物的反應(yīng)底物呈液相是它們的不同點(diǎn)。事實(shí)上，親和層析是在含有活化基團(tuán)的基質(zhì)M上以共價(jià)鍵的方式固化具有識(shí)別能力的配體L，將固相載體制作成功而固化后的配體束縛特異物質(zhì)的能力依然保持。所以當(dāng)在小層析柱裝入固相載體，使得欲分離的樣品在該柱經(jīng)過(guò)。此時(shí)，樣品中對(duì)配體有親和力的物質(zhì)S就能夠通過(guò)結(jié)構(gòu)互補(bǔ)效應(yīng)、范德瓦爾力與靜電引力等作用在固相載體上吸附著。 化學(xué)分析蛋白純化系統(tǒng)

專(zhuān)業(yè)蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)

儀器儀表是用以檢出、測(cè)量、觀(guān)察、計(jì)算各種物理量、物質(zhì)成分、物性參數(shù)等的器具或設(shè)備。真空檢漏儀、壓力表、測(cè)長(zhǎng)儀、顯微鏡、乘法器等均屬于儀器儀表。近年來(lái)，得益于機(jī)械、冶金、石化行業(yè)等儀器儀表服務(wù)領(lǐng)域經(jīng)營(yíng)狀況的好轉(zhuǎn)，我國(guó)儀器儀表制造業(yè)發(fā)展一路向好。隨著互聯(lián)網(wǎng)的逐步發(fā)展，為蛋白純化色譜系統(tǒng)，凝膠凈化色譜系統(tǒng)，制備液相色譜，柱塞泵等產(chǎn)品的傳播提供了一個(gè)飛速的平臺(tái)。讓儀器儀表行業(yè)從傳統(tǒng)的銷(xiāo)售模式到以互聯(lián)網(wǎng)電子商務(wù)為主的營(yíng)銷(xiāo)方式的轉(zhuǎn)變，促進(jìn)了儀器儀表行業(yè)與互聯(lián)網(wǎng)的結(jié)合，推動(dòng)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新發(fā)展。機(jī)器人與自動(dòng)化設(shè)備、機(jī)械電子設(shè)備的研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售及技術(shù)咨詢(xún)；光學(xué)檢測(cè)設(shè)備、光電產(chǎn)品研發(fā)、制造、銷(xiāo)售；實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、儀器儀表的研發(fā)、制造、銷(xiāo)售及提供相關(guān)的技術(shù)咨詢(xún)和售后服務(wù)；自營(yíng)和代理各類(lèi)商品及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)（限定企業(yè)經(jīng)營(yíng)或禁止進(jìn)出口的商品和技術(shù)除外）。（依法需經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)）產(chǎn)品普遍運(yùn)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、交通、科技、環(huán)保、**、文教衛(wèi)生、大家生活等各個(gè)領(lǐng)域，在旺盛市場(chǎng)需求的帶動(dòng)下和我國(guó)宏觀(guān)調(diào)控政策的引導(dǎo)下，我國(guó)儀器儀表行業(yè)的發(fā)展有了長(zhǎng)足的進(jìn)步空間。盡管在我國(guó)相關(guān)政策的引導(dǎo)和支持下，我國(guó)儀器儀表行業(yè)得到了飛速發(fā)展。但是從加工整體上看，我國(guó)的儀器儀表行業(yè)還是落后于國(guó)際水平的。重點(diǎn)技術(shù)缺乏、高精尖產(chǎn)品嚴(yán)重依賴(lài)進(jìn)口、儀器儀表產(chǎn)品同質(zhì)化嚴(yán)重、生產(chǎn)工藝落后、研發(fā)能力弱、精度不高等問(wèn)題的凸顯，為儀器儀表行業(yè)的發(fā)展帶來(lái)了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。專(zhuān)業(yè)蛋白純化系統(tǒng)廠(chǎng)家報(bào)價(jià)

蘇州英賽斯智能科技有限公司致力于儀器儀表，是一家生產(chǎn)型公司。公司業(yè)務(wù)分為蛋白純化色譜系統(tǒng)，凝膠凈化色譜系統(tǒng)，制備液相色譜，柱塞泵等，目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn)，為客戶(hù)提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力，努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí)，遵守行業(yè)規(guī)范，植根于儀器儀表行業(yè)的發(fā)展。英賽斯憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專(zhuān)業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來(lái)的聲譽(yù)和口碑，讓企業(yè)發(fā)展再上新高。

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