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DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基質(zhì)上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。合成過程第yi個(gè)堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個(gè)堿基的5’-OH用二對(duì)甲氧三苯甲基DMT保護(hù),浙江直銷基因合成儀哪家好,堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù),浙江直銷基因合成儀哪家好,然后對(duì)3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化?!?OH和下個(gè)堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,2.然后用碘氧化成磷酸三酯3.加入二氯乙酸除去第二個(gè)堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT循環(huán)進(jìn)行加入下一個(gè)堿基合成完畢后1。用苯硫酚除去5’-OH上的保護(hù)劑DMT2。用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開,洗脫3。用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護(hù)劑4。除去氫氧化銨,浙江直銷基因合成儀哪家好,真空抽干5。液相色譜或者PAGE,回收片段**長(zhǎng)的。為了防止阻塞,節(jié)流閥應(yīng)該1個(gè)月清洗1次,清洗時(shí),先在水中煮沸15min,然后再在甲醇中超聲波清洗。浙江直銷基因合成儀哪家好
13)如果分部收集器用來(lái)收集每個(gè)DMT脫保護(hù)步驟的流出物,確保試管充分清潔干凈,并打開分部收集器,確保DMT廢液管路通向分部收集器。14)啟動(dòng)循環(huán),運(yùn)行開始程序清洗試劑管路,除去原來(lái)的試劑。注意:TritylOnAuto表示在合成寡核苷酸的5’端核苷酸帶有一個(gè)DMT,并將其從固相載體上切下來(lái),儲(chǔ)存在收集瓶中;TritylOffAuto表示在合成寡核苷酸的5,端核苷酸沒有保護(hù)基團(tuán),將其從固相載體上切下來(lái),儲(chǔ)存在收集瓶中;TritylOnManual表示合成寡核苷酸的5’端核苷酸帶有一個(gè)DMT,寡核苷酸沒有從固相載體上切下來(lái),而是保留在合成柱中;TritylOffManual表示在合成寡核苷酸的5,端核苷酸沒有保護(hù)基團(tuán),寡核苷酸沒有從固相載體上切下來(lái),而是保留在合成柱中。DNA合成儀日常維護(hù)編輯1.瓶塞“O”形環(huán)一月檢查一次“O”形環(huán),**少1年更換1次。將新的備用“O”形環(huán)與儀器上的相比較,如果在“O”形環(huán)上出現(xiàn)白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進(jìn)行清洗。更換“O”形環(huán)的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環(huán),從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形環(huán)的白色聚氟乙烯插塞(tefloninsert);確保插塞上沒有顆粒后,用手指將新“O”形環(huán)推進(jìn)槽,進(jìn)行壓力實(shí)驗(yàn)。海南進(jìn)口基因合成儀廠家直供柱子是對(duì)稱的(沒有頂端和底部、前后之分),可以以任何方式與公路厄氏接頭相連接。
當(dāng)前DNA合成儀的主要生產(chǎn)廠商都致力于機(jī)器性能的完善和應(yīng)用領(lǐng)域的開拓以及高效率、高產(chǎn)率的儀器的開發(fā)與研究。中國(guó)臺(tái)灣科學(xué)委yuan會(huì)“基因醫(yī)藥衛(wèi)生科技前列研究計(jì)劃”中的基因生物技術(shù)組已經(jīng)成功研發(fā)全世界第yi臺(tái)高密度復(fù)制DNA合成儀,可以同時(shí)合成384條不同DNA,每日可合成768條DNA,并可以配合聚合酶連鎖反應(yīng)裝置,大量復(fù)制各種基因,不但節(jié)省時(shí)間,也可節(jié)省大量人力,這部機(jī)器能復(fù)制動(dòng)物、人體、植物的基因甚至是防偽基因。
由于人們所需要的大部分核酸的堿基對(duì)數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過DNA合成儀可以合成的**長(zhǎng)核酸鏈的堿基對(duì)數(shù)量,因此還需要不斷改善合成工藝才能得到較長(zhǎng)的核酸分子。
二、按試劑堿基添加方式分類,DNA合成儀可分為電磁閥氣動(dòng)驅(qū)動(dòng),蠕動(dòng)泵驅(qū)動(dòng)兩種類型。1,電磁閥氣動(dòng)驅(qū)動(dòng)型:采用高于大氣壓的惰性氣體(氬氣,氮?dú)饣蚝猓閴A基試劑溶液的驅(qū)動(dòng)方式,通過微量電磁閥的開合添加試劑或堿基溶液。主要品牌包括ABI系列合成儀,oligomaker系列合成儀,biolytic系列合成儀,GE系列合成儀及mermade系列DNA合成儀等。2,采用蠕動(dòng)泵驅(qū)動(dòng)型:采用精密蠕動(dòng)泵為堿基試劑溶液的驅(qū)動(dòng)方式,通過蠕動(dòng)泵驅(qū)動(dòng),滑塊的相互滑動(dòng)選擇添加不同堿基試劑溶液。主要品牌包括德國(guó)POLYGEN系列DNA合成儀。三、按產(chǎn)物承載容器分,可分為需要一次性合成柱,無(wú)需一次性合成儀兩類。除德國(guó)polygen系列合成儀外,其它所有品牌合成儀,如,oligomaker,mermade,ASM,POLYPLEX,ABI等都使用一次性合成柱作為合成產(chǎn)物的承載容器。 合成信息顯示在液晶顯示屏上,通過選擇鍵板上的鍵可與儀器交流。
除了加壓外,亞磷酰胺瓶都是用壓力排氣管排氣的。把亞磷酰胺放入儀器前,要用氬氣排除空氣使其凈化。凈化是通過輸送管輸送氣體,當(dāng)氣體輸送到瓶?jī)?nèi)時(shí),空氣經(jīng)壓力排氣管排出。這是由瓶子更換步驟自動(dòng)完成的。廢液瓶是輸送系統(tǒng)的低壓側(cè),必須將出口與大氣相通。要確保排氣管通到通風(fēng)柜。如果排氣管阻塞,將會(huì)產(chǎn)生反壓,試劑和溶劑的輸送會(huì)受到抑制。
試劑輸送系統(tǒng)包括兩個(gè)試劑閥塊(8堿基儀器有3個(gè))及2個(gè)或4個(gè)柱閥塊。閥塊控制氣體和化學(xué)試劑流入柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外,試劑和溶劑都被同時(shí)輸送到所有活化柱。當(dāng)有多個(gè)活化柱時(shí),對(duì)流速的細(xì)微變化,以自動(dòng)調(diào)節(jié)每個(gè)柱子的輸送次數(shù)來(lái)補(bǔ)償。每一個(gè)5—端口柱閥塊將流出物導(dǎo)入廢液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或沖洗柱內(nèi)和柱閥塊內(nèi)的試劑的氬氣。 檢查連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)是否充滿。海南進(jìn)口基因合成儀廠家直供
細(xì)檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時(shí)換掉試劑瓶,特別注意乙腈的量,因?yàn)樵撊軇┯昧枯^大。浙江直銷基因合成儀哪家好
PSI200多通道多肽合成儀1.技術(shù)參數(shù)通道數(shù)3或6通道反應(yīng)器10ml、20ml或40ml合成規(guī)模試劑儲(chǔ)罐4個(gè)500ml溶劑儲(chǔ)罐(標(biāo)準(zhǔn)配置)1個(gè)30L、1個(gè)2L、2個(gè)500ml試劑儲(chǔ)罐(與PSI400D匹配)反應(yīng)器攪拌模式180度或270度上下翻轉(zhuǎn)的無(wú)死角機(jī)械攪拌模式反應(yīng)器攪拌速度無(wú)極可調(diào)反應(yīng)器攪拌強(qiáng)度無(wú)極可調(diào)合成樹脂攪拌不傷樹脂合成過程全程氮?dú)獗Wo(hù)合成方式Fmoc/tBoc活化方式預(yù)活化、沉淀活化和非沉淀活化合成步驟4至6步即可完成氨基酸的合成耦合效率耦合效率可達(dá)99%以上主要特點(diǎn):1.耦合效率高?0度-180度機(jī)械上下轉(zhuǎn)動(dòng)混合,反應(yīng)徹底無(wú)死角,樹脂無(wú)損壞且完全參加反應(yīng),平均氨基酸的耦合率都在99%以上;?與氮?dú)夤呐菔?、頂置式、搖床、鐘擺式、渦旋式等攪拌方式相比180度上下翻轉(zhuǎn)效果zui佳;?很多多肽科學(xué)家手工試驗(yàn)證明:180度機(jī)械攪拌方式是多肽合成的zui佳方式。2.零耗材設(shè)計(jì)?運(yùn)行費(fèi)用幾乎為零;?儀器內(nèi)部管路和反應(yīng)器都采用了316L不銹鋼過濾膜,永jiu不需更換;?試劑儲(chǔ)罐采用實(shí)驗(yàn)室通用器材,客戶可方便且便宜地買到;3.程序簡(jiǎn)單完美,是多肽合成儀中**為優(yōu)化的一種?指令程序編制模塊化人性化,可以方便地對(duì)每一參數(shù)進(jìn)行調(diào)整,甚至重新編排,方便使用者學(xué)習(xí)、編輯、修改和運(yùn)行。浙江直銷基因合成儀哪家好
昆山伯利克精密儀器有限公司致力于儀器儀表,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求。昆山伯利克深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)В瑸榭蛻籼峁?**的DNA/RNA引物合成儀,768道合成儀,192c合成儀,48合成儀。昆山伯利克致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來(lái)良好體驗(yàn)。昆山伯利克創(chuàng)始人jingdong tian,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。
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