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產(chǎn)品關鍵詞:天津直銷RNA合成儀企業(yè),RNA合成儀
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詳細說明
用于和DNA或RNA結構類似的寡核苷酸合成的自動化儀器,即是DNA合成儀。通常用于固相合成法,每次在長的寡核苷酸鏈上接入一個核苷酸。加入每一個核苷酸均通過相同的化學反應和相應的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。儀器不同,所用化學反應和操作細節(jié)也會隨之發(fā)生變化。DNA合成的磷酸酰胺法得到了非常***的應用。操作步驟亞磷酰胺DNA合成的試劑:氨水切除溶液乙腈清洗溶劑12氧化混合物三lv乙酸(TCA)脫保護溶液N—甲基咪唑封閉試劑乙酐四唑偶聯(lián)催化劑A、G、C、T亞磷酰胺單體保護堿基的5/—DM以以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例,操作步驟如下:1、對合成儀上所有試劑瓶中的試劑量認真檢。2、在合成儀上裝上標記好的干凈的收集瓶。3、在合成儀中輸入要合成的DNA序列。4、對選擇的合成步驟進行檢查,天津直銷RNA合成儀企業(yè),天津直銷RNA合成儀企業(yè)。5,天津直銷RNA合成儀企業(yè)、選擇結束方法:儀器的原始狀態(tài)為TritylOffAuto,如果想要通過5,—DMT基團連接純化寡核苷酸,那么將其轉變?yōu)門ritylOnAuto結束狀態(tài)。6、選擇結束方法通常是為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。7、將你所希望的保存名字輸入到每個柱監(jiān)視器下。8、每一個收集瓶相應的DNA序列標記用代碼代替。9、將每一個柱設置的詳細資料打印出來。10、對打印出來的資料進行檢查,判斷是否正確。亞磷酰胺瓶都是用壓力排氣管排氣的。天津直銷RNA合成儀企業(yè)
手工測序以及自動測序均屬于DNA序列測定,手工測序可分為maxam-gilbert化學降解法與sanger雙脫氧鏈終止法,事實上,目前dna序列分析的主流是自動測序。373型、377型、310型、3700和3100型等多種型號DNA測序儀均已經(jīng)被美國peabi公司生產(chǎn)出來了,在這幾款DNA測序儀中,臨床檢測實驗室使用**多的一種型號要屬310型。發(fā)展歷史70年代末,化學法和雙脫氧手動測序,同位素標記法分別由WalterGilbert與FrederickSanger發(fā)明出來。80年代中期,應用雙脫氧終止法原理,自動測序儀出現(xiàn)了,同位素被熒光取代了,計算機圖象識別。90年代中期,測序儀得到了重大改進,凝膠電泳由集束化的毛細管電泳取代了。2001年,人類基因組框架圖被完成。注意事項1.bigdye熒光標記終止底物循環(huán)測序試劑盒為本實驗使用的測序試劑盒,通常650bp左右為可測dna長度,(±)%為本儀器dna測序精確度,如果儀器所需測定的長度高于650bp,不能辨讀的堿基n<2%,那么就需要設計另外的引物。能夠設計反向引物對同一模板進行測序,相互印證以便確保更為準確地測序。能夠人工核對n堿基,有時能夠?qū)⑵浔孀x出來,為了使測序的精確度提高,按照星號提示位置,能夠?qū)υ撎幉噬珗D譜進行人工分析,進一步核對該處堿基。天津直銷RNA合成儀企業(yè)啟動循環(huán),運行開始程序清洗試劑管路,除去原來的試劑。
小量的試劑可以在流路節(jié)流閥中結晶,長期這樣會造成流路阻塞。廢液和排氣大多數(shù)化學試劑輸送的**終點是廢液瓶,廢液瓶是一個空立著的10L的聚苯乙烯容器,可放在合成儀附近的地板上或放在低于儀器的附近工作臺上。排氣管將廢氣導入適當?shù)呐艢庋b置,如排煙罩電導池電導流動池是為了測定在每個DNA合成循環(huán)內(nèi)釋放的DMT陽離子的總電導而設計的。流動池是由一空隙隔開的兩個電極組成,在空隙之間應用一小電壓。DMT陽離子流過電導池時起電導作用。
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**初是sanger法,后來發(fā)展了幾種高通量測序方法1sanger法:雙脫氧測序的原理,DNA合成時加上一個ddNTP從而終止這條鏈的延伸,毛細管電泳讀取分析序列。一般教材講的都是這種方法,經(jīng)典,讀長800bp,但是通量小成本高。2454:也稱焦磷酸測序,一個run下來約400M的數(shù)據(jù)量。將emulsionPCR產(chǎn)物連磁珠上,放入PicoTiterPlate,測序反應是通過釋放PPi經(jīng)過ATP***化酶和熒光素酶作用發(fā)光D捕捉拍照,反應是連續(xù)的,所以遇到連續(xù)的堿基如polyA時,454易產(chǎn)生誤差。3Solexa:邊合成邊測序,將DNA單鏈固定在芯片上,合成DNA簇,是一種可逆阻斷的合成反應,每個循環(huán)只加上一個堿基、系統(tǒng)拍照一次。通過讀取拍照信號分析序列,一個run約200個G數(shù)據(jù)量以上。目前能量比較高,不足是讀長短,現(xiàn)在有PE150,可以測通300bp。4Soild:與454有相似之處,該方法更精細,磁珠富集,磁珠更小,密度更高。它的獨特之處是連接反應測序,加入8堿基熒光單鏈混合物。一次測序讀兩個堿基,獲得顏色編碼組成的堿基序列,通過幾輪反應**終得出序列。5Iontorrent:特點是小巧。試劑通過集成的流體通路進入芯片中,密布于芯片上的反應孔立即成為上百萬個微反應體系。軟件儲存在一個可取出的存儲卡中,這個存儲卡插在儀器的背面。
1)2-8柱DNA/RNA核酸合成儀,封閉系統(tǒng),世界上**小的合成儀2)使用通用型或標準型CPG3)合成規(guī)模為μmol,耦合效率>,合成過程中可以從每一個位置重新開始4)每個循環(huán)時間約3到4min,合成20bp的普通引物不到一個小時5)12個單**置,不同的接頭適應不同大小的瓶子6)不需要進行單體預混合,具有修飾和擺動混合堿基的功能7)結構緊湊:W350×D340×H430mm,15kg8)所有的柱子在線脫保護監(jiān)測9)對柱子無特殊要求10)自動反義引物合成11)氣體消耗少;低保養(yǎng)和維護費用;軟件設計靈活我們有關于合成方面的**,可以**提供儀器使用及相關的咨詢服務。昆山伯利克精密儀器有限公司Biolytic中國,依托和憑借Biolytic***的產(chǎn)品、儀器、現(xiàn)場支持和安裝、服務。隨著您邁向未來,與您共同成長。DNA合成儀一般需堿基瓶組及試劑瓶組。天津直銷RNA合成儀企業(yè)
滑塊的相互滑動選擇添加不同堿基試劑溶液。天津直銷RNA合成儀企業(yè)
加入2/3倍體積的-20℃預冷異丙醇,混勻,靜置約30min6.用毛細玻棒挑出絮狀沉淀,用75%乙醇反復漂洗數(shù)次,再用無水乙醇漂洗1次,吹干,重懸于500ulTE中7.加入1ulRNaseA(10mg/mL),37℃處理1h8.用酚():氯仿:異戊醇(25:24:1)和氯仿:異戊醇(24:1)各抽提1次(10,000rpm,4℃離心5min)9.取上清,1/10V3MNaAc,℃沉淀30min以上10.沉淀用75%乙醇漂洗,風干,溶于200ulTE中,-20℃保存?zhèn)溆肈NA提取緩沖液:100mMTris-HCl(),20mMEDTA(),NaCl,2%CTAB(W/V),4%PVP40(W/V)和2%巰基乙醇(V/V),PVP和巰基乙醇使用前加入5MKAc方法一和二,是大同小異.主要是DNA提取液配方不一樣!成本也不一樣!三、菌絲的總RNA的提取1.實驗試劑(1)RNA提取緩沖液(CTAB):2%CTAB(W/V),2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100mMTris-HCl(),25mMEDTA,亞精胺Spermidine,NaCl,2%巰基乙醇(V/V,使用前加入).由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發(fā)生反應,所以配RNA提取緩沖液時直接用DEPC處理的水配制即可(2)SSTE:1MNaCl,SDS(W/V),10mMTris-HClEDTA(3)10MLiCl直接用蒸餾水配10MLiCl,加1‰的DEPC過夜后,高溫滅菌(4)3MNaAc(5)氯仿:異戊醇(24:1)(6)酚():氯仿:異戊醇(25:24:1)(7)DEPC處理水用1‰的DEPC處理蒸餾水過夜,高溫滅菌(8)無水乙醇。天津直銷RNA合成儀企業(yè)
昆山伯利克精密儀器有限公司致力于儀器儀表,以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求。昆山伯利克擁有一支經(jīng)驗豐富、技術創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供DNA/RNA引物合成儀,768道合成儀,192c合成儀,48合成儀。昆山伯利克致力于把技術上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。昆山伯利克始終關注儀器儀表行業(yè)。滿足市場需求,提高產(chǎn)品價值,是我們前行的力量。
文章來源地址: http://m.cdcfah.com/cp/1565026.html
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