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當(dāng)前DNA合成儀的主要生產(chǎn)廠商都致力于機(jī)器性能的完善和應(yīng)用領(lǐng)域的開拓以及高效率、高產(chǎn)率的儀器的開發(fā)與研究。中國(guó)臺(tái)灣科學(xué)委yuan會(huì)“基因醫(yī)藥衛(wèi)生科技前列研究計(jì)劃”中的基因生物技術(shù)組已經(jīng)成功研發(fā)全世界第yi臺(tái)高密度復(fù)制DNA合成儀,可以同時(shí)合成384條不同DNA,浙江操作性能好基因合成儀哪個(gè)牌子好,每日可合成768條DNA,并可以配合聚合酶連鎖反應(yīng)裝置,浙江操作性能好基因合成儀哪個(gè)牌子好,大量復(fù)制各種基因,不但節(jié)省時(shí)間,也可節(jié)省大量人力,這部機(jī)器能復(fù)制動(dòng)物,浙江操作性能好基因合成儀哪個(gè)牌子好、人體、植物的基因甚至是防偽基因。
由于人們所需要的大部分核酸的堿基對(duì)數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)DNA合成儀可以合成的**長(zhǎng)核酸鏈的堿基對(duì)數(shù)量,因此還需要不斷改善合成工藝才能得到較長(zhǎng)的核酸分子。
DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基質(zhì)上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。合成過(guò)程第yi個(gè)堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個(gè)堿基的5’-OH用二對(duì)甲氧三苯甲基DMT保護(hù),堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù),然后對(duì)3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化?!?OH和下個(gè)堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,2.然后用碘氧化成磷酸三酯3.加入二氯乙酸除去第二個(gè)堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT循環(huán)進(jìn)行加入下一個(gè)堿基合成完畢后1。用苯硫酚除去5’-OH上的保護(hù)劑DMT2。用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開,洗脫3。用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護(hù)劑4。除去氫氧化銨,真空抽干5。液相色譜或者PAGE,回收片段**長(zhǎng)的。
試劑驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)一般地,DNA合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮?dú)饧半姶砰y組驅(qū)動(dòng)液體試劑,也可采用氦氣驅(qū)動(dòng)試劑。某些合成儀采用sliderblock滑塊系統(tǒng)及精密蠕動(dòng)泵,可不采用氣體為驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動(dòng)液體試劑時(shí),需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓,通過(guò)合成管理軟件或手動(dòng)打開電磁閥(一般打開時(shí)間為數(shù)ms),即可驅(qū)動(dòng)液體試劑到所需的合成柱中。試劑和堿基瓶組DNA合成儀一般需堿基瓶組及試劑瓶組。試劑瓶組一般**少為6個(gè),含脫保護(hù)劑(Deb)、活化劑(act)、蓋帽試劑A(capA)、蓋帽試劑B(capB)、氧化劑(OXI)及洗脫乙腈(),每種儀器一般都多設(shè)置1-2個(gè)試劑瓶位,用于特殊產(chǎn)物的合成。堿基瓶組一般**少為4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)堿基(A/C/G/T),同時(shí)搭配2-多個(gè)特殊堿基瓶位,用于熒光標(biāo)記等合成。壓力管路及輸送管路DNA合成儀的一般原則需要保持內(nèi)外氣體隔絕,因此無(wú)論試劑瓶、堿基瓶均需密封保持一定壓力。所有壓力管路均采用特氟龍導(dǎo)管,直徑為1/16—1/8吋。每個(gè)瓶子都有一個(gè)氬氣壓力管道及輸送管道進(jìn)入瓶蓋插塞,對(duì)于亞磷酰胺,1—8號(hào)瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上,而輸送管卻伸到瓶的底部。
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