需求數量:0
價格要求:面議
所在地:江蘇省
包裝要求:
產品關鍵詞:四川化學分析蛋白純化系統***的選擇,蛋白純化系統
***更新:2020-09-05 23:08:04
瀏覽次數:0次
聯系我們
當前位置:首頁?產品供應?儀器儀表?生物儀器?其他生物儀器?四川化學分析蛋白純化系統***的選擇 蘇州英賽斯智能科技供應
聯系人:李大為
郵箱: 570745634@qq.com
電話: 18606243033
傳真: 0512_63937379
網址: http://www.inscinstech.com.cn
手機: 0512-63937378
地址: 吳江經濟技術開發(fā)區(qū)聯楊路南側、龍橋路西側
[當前離線] [加為商友] [發(fā)送信件]
詳細說明
蛋白質分離純化步驟(二) 2.4.3. 親和層析 親和層析(affinity-chromatography)分離技術是根據許多蛋白質對特定的化學基團具有專一性結合的原理。這些能被生物大分子如蛋白質所識別并與之結合的基團稱為配基或配體(ligand)。親和層析是一種極有效的分離純化蛋白質的方法。例如酶對它的底物具有特殊的親和力;抗原和抗體互為配基,四川化學分析蛋白純化系統***的選擇。以伴刀豆球蛋白A(concanavalin A)的分離純化為例,由于該蛋白對葡萄糖有專一性親和吸附,因此可把葡萄糖通過適當的化學反應共價地連接到像瓊脂糖凝膠一類的載體表面上。為了防止載體表面的空間位阻影響待分離的蛋白質大分子與其配基的結合,四川化學分析蛋白純化系統***的選擇,在配基和載體之間往往插入一段所謂的連接臂(或稱為間隔臂,spacerarm),使配體與載體之間保持足夠的距離。 將這種多糖顆粒裝入一定規(guī)格的玻璃管中就制成了一根親和層析柱。當含有伴刀豆球蛋白的提取液加到層析柱的上部,四川化學分析蛋白純化系統***的選擇,并沿柱從上往下過時,待純化的蛋白質與其特異性配基結合而被吸附到柱上,其他蛋白因不能與葡萄糖配基結合將通過柱子而流出(圖2-28a)。然后采用一定的洗脫條件,如濃的葡萄糖溶液進行洗脫,即可把該蛋白質洗脫下來,達到與其它蛋白質分離的目的。四川化學分析蛋白純化系統***的選擇
蛋白質分離純化步驟(二) 2.4 樣品的進一步分離純化 用等電點沉淀法、鹽析法所得到的蛋白質一般含有其他蛋白質雜質,須進一步分離提純才能得到有一定純度的樣品。常用的純化方法有:凝膠過濾層析、離子交換纖維素層析、親和層析等等。有時還需要這幾種方法聯合使用才能得到較高純度的蛋白質樣品。 1. 凝膠過濾層析 凝膠過濾層析(gel-filtration chromatography)又稱為分子排阻層析或分子篩層析。它是將葡聚糖凝膠(Sephadex)裝入一個柱子中,制成凝膠柱。這種凝膠顆粒具有網狀結構,不同類型凝膠的網孔大小不同。當把蛋白質混合樣品加到凝膠柱中時,比凝膠網孔小的蛋白質可進入網孔內,而大于網孔的分子則不能進入被排阻在凝膠顆粒之外。當用洗脫液洗脫時,被排阻的分子量大的蛋白質直接通過凝膠之間的縫隙先被洗脫下來,而比網孔小的蛋白質可連續(xù)不斷地進入網孔內。這樣的小分子不但流經的路程長,而且受到來自凝膠內部的阻力也很大,所以蛋白質越小,從柱子上洗脫下來所需時間越長。由于不同蛋白質的分子大小不同,進入網孔的程度不同,因此流出的速度不同,洗脫所用體積及時間不同,從而達到分離的目的。四川直銷蛋白純化系統上門維修
蛋白質分離純化步驟(二) 2.4.2 纖維素柱層析法 該法是利用蛋白質的酸堿性質作為分離的基礎。離子交換纖維素(cellulose ion-exchanger)是人工合成的纖維素衍生物,它具有松散的親水性網狀結構,有較大的表面積,使蛋白質大分子可以自由通過。因此常用于蛋白質的分離。 (1)羧甲基纖維素(CM-纖維素) 在纖維素顆粒上帶有羧甲基基團。在中性pH條件下,羧甲基上的質子可解離下來(圖2-27a),而溶液中帶正電荷的蛋白質分子可與纖維素顆粒上的羧甲基負電荷結合。可交換的基團帶正電,因此是一種陽離子交換劑。蛋白質與離子交換纖維素之間結合能力的大小取決于彼此間相反電荷基團之間靜電吸引。 (2)二乙氨基乙基纖維素(DEAE-纖維素) 在中性pH條件下,它含有帶正電荷的基團,可與溶液中的帶負電荷的蛋白質結合,可交換的基團帶負電荷,因此是一種陰離子交換劑。當某一蛋白質混合溶液通過裝有DEAE-纖維素的層析柱時,帶正電荷的蛋白質不能結合而隨著洗脫液的流動先被洗脫下來。帶負電荷的蛋白質將被結合到柱上。結合力取決于彼此相反電荷基團間的靜電吸引。然后選用一定pH和離子強度的緩沖液進行洗脫,改變蛋白質分子所帶的靜電荷,依次從層析柱流出達到相互分離的目的。
實驗室及中試放大規(guī)模蛋白純化系統 Unique Autopure系列蛋白純化系統 主要應用領域 : – 蛋白純化系統主要應用于單抗、重組蛋白、疫苗、生化 藥、、天然產物和多糖等生物制藥領域。用于生物制品的下游工藝的分離純化。 Unique AutoPure 系列蛋白純化系統 : 產品特點及優(yōu)勢: – 模塊化設計,提供多個配置,滿足特殊工藝流程需求 - 低脈動高精度雙柱塞輸液泵 ,保證優(yōu)異的分離重現性 ; – 全系統與液體接觸的地方均由生物兼容性材料組成、符合FDA、USP VI等相關法規(guī)要求 ; – DAD全譜直讀檢測器,避免了傳統的機械切換式檢測器所帶來的不穩(wěn)定性及高故障率 ; – 固定波長檢測器燈為長壽命LED燈,壽命大于8000小時,降低維護成本 ; – **技術紫外檢測器流通池,低死體積、低峰拓展,提高了色譜分離度 ; – 高靈敏度在線pH、電導率、紫外檢測器,低死體積、低峰拓展,提高了色譜分離度 ; – 集中了buffer選擇閥,自動進樣閥、柱位閥等自動化組件,提高了純化的自動化程度 ; – 具有柱前、柱后、壓差報警,氣泡傳感器檢測等功能,極大的保護了系統及層析柱的安全性 ; – 層析工作站軟件是一款功能強大、性能先進、高穩(wěn)定性的色譜數據管理系
三、蛋白質分子量的測定 蛋白質分子量測定的方法很多,目前常用的方法有以下幾種。 3.1 凝膠過濾法 凝膠過濾法測定蛋白質分子量的原理如“分離純化方法”中所 述。一定型號的凝膠顆粒上具有一定大小的孔隙,只允許較小的分子進入膠粒,而大于孔隙的分子則不能進入膠粒而被排阻在膠粒外面。用洗脫液洗脫時,被排阻的分子量大的蛋白質先被洗脫下來,隨后能夠進入顆粒的蛋白質也按分子量大小而先后被洗脫下來,分子量越小的越后被洗脫下來。由于不同排阻范圍的葡聚糖凝膠有一特定的蛋白質分子量范圍,在此范圍內,分子量的對數和洗脫體積之間成線性關系。因此,用幾種已知分子量的蛋白質為標準進行層析分析,以每種蛋白質的洗脫體積對它們的分子量的對數作圖,繪制出標準洗脫曲線。未知蛋白質在同樣的條件下進行層析分析,根據其所用的洗脫體積,從標準洗脫曲線上可求出此未知蛋白質對應的分子量來。北京智能蛋白純化系統***的選擇
四川化學分析蛋白純化系統***的選擇
三、蛋白質分子量的測定 3.3 沉降法 沉降法又稱超速離心法。蛋白質溶液在受到強大的離心力作用時,蛋白質分子趨于下沉,沉降速度與蛋白質分子的大小、密度和分子形狀有關,也與溶劑的密度和粘度有關。蛋白質顆粒在離心場中的沉降速度用每單位時間內顆粒下沉的距離來表示。 在離心場中,蛋白質分子所受到的凈離心力(離心力減去浮力)與溶劑的摩擦力平衡時,每單位離心場強度的沉降速度稱為沉降系數(Sedimentation Coefficient)。國際上采用Svedberg單位作為沉降系數的單位,用S表示,以紀念超速離心法的創(chuàng)始人,瑞典***的蛋白質化學家T.Svedberg。一個Svedberg單位(或直接稱一個S)為1×10—13s。蛋白質的沉降系數大約在1×10—13~200×10—13s范圍內,即1S~200S。四川化學分析蛋白純化系統***的選擇
蘇州英賽斯智能科技有限公司總部位于吳江經濟技術開發(fā)區(qū)聯楊路南側、龍橋路西側,是一家機器人與自動化設備、機械電子設備的研發(fā)、生產、銷售及技術咨詢;光學檢測設備、光電產品研發(fā)、制造、銷售;實驗室設備、儀器儀表的研發(fā)、制造、銷售及提供相關的技術咨詢和售后服務;自營和代理各類商品及技術的進出口業(yè)務(限定企業(yè)經營或禁止進出口的商品和技術除外)。(依法需經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動)的公司。公司自創(chuàng)立以來,投身于蛋白純化色譜系統,凝膠凈化色譜系統,制備液相色譜,柱塞泵,是儀器儀表的主力軍。英賽斯始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。英賽斯始終關注儀器儀表行業(yè)。滿足市場需求,提高產品價值,是我們前行的力量。
文章來源地址: http://m.cdcfah.com/cp/1171128.html
本企業(yè)其它產品 更多>>