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產(chǎn)品關鍵詞:山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇,蛋白純化系統(tǒng)
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詳細說明
蛋白質分離純化步驟(二) 2.4.3. 親和層析 親和層析(affinity-chromatography)分離技術是根據(jù)許多蛋白質對特定的化學基團具有專一性結合的原理。這些能被生物大分子如蛋白質所識別并與之結合的基團稱為配基或配體(ligand)。親和層析是一種極有效的分離純化蛋白質的方法。例如酶對它的底物具有特殊的親和力;抗原和抗體互為配基。以伴刀豆球蛋白A(concanavalin A)的分離純化為例,山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇,由于該蛋白對葡萄糖有專一性親和吸附,因此可把葡萄糖通過適當?shù)幕瘜W反應共價地連接到像瓊脂糖凝膠一類的載體表面上,山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇。為了防止載體表面的空間位阻影響待分離的蛋白質大分子與其配基的結合,在配基和載體之間往往插入一段所謂的連接臂(或稱為間隔臂,spacerarm),使配體與載體之間保持足夠的距離。 將這種多糖顆粒裝入一定規(guī)格的玻璃管中就制成了一根親和層析柱。當含有伴刀豆球蛋白的提取液加到層析柱的上部,并沿柱從上往下過時,待純化的蛋白質與其特異性配基結合而被吸附到柱上,其他蛋白因不能與葡萄糖配基結合將通過柱子而流出(圖2-28a)。然后采用一定的洗脫條件,山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇,如濃的葡萄糖溶液進行洗脫,即可把該蛋白質洗脫下來,達到與其它蛋白質分離的目的。山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇
三、蛋白質分子量的測定 3.3 沉降法 沉降法又稱超速離心法。蛋白質溶液在受到強大的離心力作用時,蛋白質分子趨于下沉,沉降速度與蛋白質分子的大小、密度和分子形狀有關,也與溶劑的密度和粘度有關。蛋白質顆粒在離心場中的沉降速度用每單位時間內顆粒下沉的距離來表示。 在離心場中,蛋白質分子所受到的凈離心力(離心力減去浮力)與溶劑的摩擦力平衡時,每單位離心場強度的沉降速度稱為沉降系數(shù)(Sedimentation Coefficient)。國際上采用Svedberg單位作為沉降系數(shù)的單位,用S表示,以紀念超速離心法的創(chuàng)始人,瑞典***的蛋白質化學家T.Svedberg。一個Svedberg單位(或直接稱一個S)為1×10—13s。蛋白質的沉降系數(shù)大約在1×10—13~200×10—13s范圍內,即1S~200S?;瘜W分析蛋白純化系統(tǒng)上門安裝
蛋白質純化方法-親和層析親和層析法包括特異性配體親和層析法以及通用性配體親和層析法。比較這兩種親和層析法。特異性配體親和層析法通常將復雜的生命大分子物質作為配體,它的結合力比較大河吸附選擇性比較強。而通用性配體親和層析法通常將簡單的小分子物質作為配體,因此,它具有低廉的成本,吸附容量比較高,通過對吸附和脫附條件的改善能夠使得層析的分辨率提高。原理親和層析的原理類似于酶-底物,***-受體與抗原-抗體等特異性反應的機理。有一定的親和力在每對反應物之間。與在酶與底物的反應中,只有特異的底物才可以結合一定的酶,使復合物產(chǎn)生相同。在親和層析中,只有特異的配體才可以和一定的生命大分子有親和力,并且使復合物產(chǎn)生。親和層析配體呈固相,而酶與底物的反應底物呈液相是它們的不同點。事實上,親和層析是在含有活化基團的基質M上以共價鍵的方式固化具有識別能力的配體L,將固相載體制作成功而固化后的配體束縛特異物質的能力依然保持。所以當在小層析柱裝入固相載體,使得欲分離的樣品在該柱經(jīng)過。此時,樣品中對配體有親和力的物質S就能夠通過結構互補效應、范德瓦爾力與靜電引力等作用在固相載體上吸附著。
蛋白質分離純化步驟 蛋白質分離純化的一般原則: 大多數(shù)蛋白質在組織細胞中都是和核酸等生物分子結合在一起,而且每種類型的細胞都含有成千上萬種不同的蛋白質。許多蛋白質在結構、性質上有許多相似之處,所以蛋白質的分離提純是一項復雜的工作。到目前為止,還沒有一**成的方法能把任何一種蛋白質從復雜的混合物中提取出來。但是對于任何一種蛋白質都有可能選擇一種較合適的分離純化程序以獲得高純度的制品。且分離的關鍵步驟、基本手段還是共同的。 蛋白質提純的目的是增加產(chǎn)品的純度和產(chǎn)量,同時又要保持和提高產(chǎn)品的生物活性。因此,要分離純化某一種蛋白質,首先應選擇一種含目的蛋白質較豐富的材料。其次,應設法避免蛋白質變性,以制備有活性的蛋白質。對于大多數(shù)蛋白質來說,純化操作都是在0~4℃的低溫下進行的。同時也應避免過酸、過堿的條件以及劇烈的攪拌和振蕩。另外,還要設法除去變性的蛋白質和其它雜蛋白,從而達到增加純度和提高產(chǎn)量的目的。
蛋白質分離純化步驟(二) 2.2 蛋白質的抽提 通常選擇適當?shù)木彌_液溶劑把蛋白質提取出來。抽提所用緩沖液的pH、離子強度、組成成分等條件的選擇應根據(jù)欲制備的蛋白質的性質而定。如膜蛋白的抽提,抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑(十二烷基磺酸鈉、tritonX-100等),使膜結構破壞,利于蛋白質與膜分離。在抽提過程中,應注意溫度,避免劇烈攪拌等,以防止蛋白質的變性。 2.3蛋白質粗制品的獲得 選用適當?shù)姆椒▽⑺牡鞍踪|與其它雜蛋白分離開來。比較方便的有效方法是根據(jù)蛋白質溶解度的差異進行的分離。常用的有下列幾種方法: 1. 等電點沉淀法 不同蛋白質的等電點不同,可用等電點沉淀法使它們相互分離。 2. 鹽析法 不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同,所以可通過調節(jié)鹽濃度將目的蛋白沉淀析出。被鹽析沉淀下來的蛋白質仍保持其天然性質,并能再度溶解而不變性。 3. 有機溶劑沉淀法 中性有機溶劑如乙醇、**,它們的介電常數(shù)比水低。能使大多數(shù)球狀蛋白質在水溶液中的溶解度降低,進而從溶液中沉淀出來,因此可用來沉淀蛋白質。此外,有機溶劑會破壞蛋白質表面的水化層,促使蛋白質分子變得不穩(wěn)定而析出。由于有機溶劑會使蛋白質變性,使用該法時,要注意在低溫下操作.山東化學分析蛋白純化系統(tǒng)廠家報價
山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇
實驗室及中試放大規(guī)模蛋白純化系統(tǒng) Unique Autopure系列蛋白純化系統(tǒng) 主要應用領域 : – 蛋白純化系統(tǒng)主要應用于單抗、重組蛋白、疫苗、生化 藥、、天然產(chǎn)物和多糖等生物制藥領域。用于生物制品的下游工藝的分離純化。 Unique AutoPure 系列蛋白純化系統(tǒng) : 產(chǎn)品特點及優(yōu)勢: – 模塊化設計,提供多個配置,滿足特殊工藝流程需求 - 低脈動高精度雙柱塞輸液泵 ,保證優(yōu)異的分離重現(xiàn)性 ; – 全系統(tǒng)與液體接觸的地方均由生物兼容性材料組成、符合FDA、USP VI等相關法規(guī)要求 ; – DAD全譜直讀檢測器,避免了傳統(tǒng)的機械切換式檢測器所帶來的不穩(wěn)定性及高故障率 ; – 固定波長檢測器燈為長壽命LED燈,壽命大于8000小時,降低維護成本 ; – **技術紫外檢測器流通池,低死體積、低峰拓展,提高了色譜分離度 ; – 高靈敏度在線pH、電導率、紫外檢測器,低死體積、低峰拓展,提高了色譜分離度 ; – 集中了buffer選擇閥,自動進樣閥、柱位閥等自動化組件,提高了純化的自動化程度 ; – 具有柱前、柱后、壓差報警,氣泡傳感器檢測等功能,極大的保護了系統(tǒng)及層析柱的安全性 ; – 層析工作站軟件是一款功能強大、性能先進、高穩(wěn)定性的色譜數(shù)據(jù)管理系山東樣品前處理蛋白純化系統(tǒng)***的選擇
蘇州英賽斯智能科技有限公司坐落吳江經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)聯(lián)楊路南側、龍橋路西側,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè)。公司是一家其他內資企業(yè)企業(yè),以誠信務實的創(chuàng)業(yè)精神、質量高速的管理團隊、精悍的職工隊伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。以滿足顧客要求為己任;以顧客永遠滿意為標準;以保持行業(yè)優(yōu)先為目標,提供***的蛋白純化色譜系統(tǒng),凝膠凈化色譜系統(tǒng),制備液相色譜,柱塞泵。英賽斯自成立以來,一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。
文章來源地址: http://m.cdcfah.com/cp/1047762.html
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